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纯水中影响胶体金制备的因素分析
1606 人阅读发布时间：2019-12-12 14:18
免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique) 是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，聚合成为特定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态。免疫胶体金技术以其特异性强、灵敏度高、操作简便、低成本、高效率等特点,被广泛应用于医学、农牧业、环境及食品检测等领域。
免疫胶体金技术检测原理
免疫胶体金技术的反应过程是一个由金颗粒、抗原与抗体动态结合的反应过程,在这个过程中很多因素影响实验的结果，如：膜、结合垫等耗材的孔径大小影响标记物的流动速率；标记蛋白、T线和C线的抗原或者抗体的纯度和浓度直接影响金标探针的质量；PH和环境条件影响检测灵敏度。
制备高质量胶体金时纯水使用的注意事项
（1）玻璃器皿必须彻底清洗，或是经过硅化处理的玻璃器皿，或用第一次配制的胶体金稳定的玻璃器皿，再用超纯水冲洗后使用。
（2）试剂配制必须保持严格的纯净，所有试剂都必须使用超纯水配制，或者在临用前将配好的试剂经超滤或微孔滤膜（0.22 µm）过滤。
（3）配制胶体金溶液的pH以中性（pH7.2）较好。
纯水中影响胶体金质量的因素：
1.水中的离子杂质会改变pH值及离子强度
pH值对胶体金颗粒大小和蛋白吸附能力有一定的影响。只有在pH接近和稍高于蛋白质的等电点时，胶体金蛋白质的吸附力较强；pH过高过低都不利于胶体金的标记。溶液的颜色也与pH值相关联。离子强度影响胶体金与蛋白质的成功结合，或导致胶体金粒子的凝聚，降低胶体金的检测能力。
2.有机物除了可能改变pH值外，还会与蛋白质形成结合体。
有机物会影响生物大分子与金颗粒结合和活化后金颗粒的稳定性，干扰蛋白-金复合体的形成，使其不稳定或者容易失活，不能获得预期大小的金颗粒，最终影响探针的灵敏度。
3.颗粒会干扰胶体金颗粒的生成。
如果金颗粒的形状不规则或粒径不均一，使得胶体金标记物容易解离和沉淀而产生金标扩散不完全、反应区底色过深和假阳性现象。
4.微生物产生的杂质影响胶体金的制备
微生物产生的代谢产物和死亡时的细胞裂解物，诸如颗粒，有机物，离子等各种杂质，也会影响胶体金的制备。
胶体金检测结果图
因此，制备胶体金务必使用品质有保证的超纯水。可以选用上海乐枫Genie G高端智能一体化纯水仪，Genie G采用lonPure 的EDI 模块、乐枫LeFil 和OrganeFil 配方填料的超纯化柱可以有效去除水中的离子、有机物，配备乐枫RephiBio 终端过滤器，可以制备无热原（内毒素）、核酸酶、细菌的超纯水。
Genie G一体化纯水仪以自来水为进水制备超纯水和 EDI 二级纯水
Genie G一体化纯水仪特色：
无线·自由
“1+N” 模式
多屏触控
智能信息管理
免疫胶体金技术检测原理
免疫胶体金技术的反应过程是一个由金颗粒、抗原与抗体动态结合的反应过程,在这个过程中很多因素影响实验的结果，如：膜、结合垫等耗材的孔径大小影响标记物的流动速率；标记蛋白、T线和C线的抗原或者抗体的纯度和浓度直接影响金标探针的质量；PH和环境条件影响检测灵敏度。
制备高质量胶体金时纯水使用的注意事项
（1）玻璃器皿必须彻底清洗，或是经过硅化处理的玻璃器皿，或用第一次配制的胶体金稳定的玻璃器皿，再用超纯水冲洗后使用。
（2）试剂配制必须保持严格的纯净，所有试剂都必须使用超纯水配制，或者在临用前将配好的试剂经超滤或微孔滤膜（0.22 µm）过滤。
（3）配制胶体金溶液的pH以中性（pH7.2）较好。
纯水中影响胶体金质量的因素：
1.水中的离子杂质会改变pH值及离子强度
pH值对胶体金颗粒大小和蛋白吸附能力有一定的影响。只有在pH接近和稍高于蛋白质的等电点时，胶体金蛋白质的吸附力较强；pH过高过低都不利于胶体金的标记。溶液的颜色也与pH值相关联。离子强度影响胶体金与蛋白质的成功结合，或导致胶体金粒子的凝聚，降低胶体金的检测能力。
2.有机物除了可能改变pH值外，还会与蛋白质形成结合体。
有机物会影响生物大分子与金颗粒结合和活化后金颗粒的稳定性，干扰蛋白-金复合体的形成，使其不稳定或者容易失活，不能获得预期大小的金颗粒，最终影响探针的灵敏度。
3.颗粒会干扰胶体金颗粒的生成。
如果金颗粒的形状不规则或粒径不均一，使得胶体金标记物容易解离和沉淀而产生金标扩散不完全、反应区底色过深和假阳性现象。
4.微生物产生的杂质影响胶体金的制备
微生物产生的代谢产物和死亡时的细胞裂解物，诸如颗粒，有机物，离子等各种杂质，也会影响胶体金的制备。
胶体金检测结果图
因此，制备胶体金务必使用品质有保证的超纯水。可以选用上海乐枫Genie G高端智能一体化纯水仪，Genie G采用lonPure 的EDI 模块、乐枫LeFil 和OrganeFil 配方填料的超纯化柱可以有效去除水中的离子、有机物，配备乐枫RephiBio 终端过滤器，可以制备无热原（内毒素）、核酸酶、细菌的超纯水。
Genie G一体化纯水仪以自来水为进水制备超纯水和 EDI 二级纯水
Genie G一体化纯水仪特色：
无线·自由
- 局域网无线通信技术
- 各单元摆脱信号线羁绊
- 主机，主控屏，手柄摆放可自由组合
- 一台水机，可配N个取水手柄
- 一台水机，可连接多个外接传感器如pH 计，溶氧测试，浊度分析等
多屏触控
主控屏为 8” 大屏，自由掌控所有用水信息- 手柄独立触屏，手动/定量取水，流速调节等
- 防水屏幕，可戴手套操作
智能信息管理
- 安装维护全程追溯
- 工作状态实时监控
- 可导出详尽且不可修改水质信息文件
关于上海乐枫生物科技有限公司
上海乐枫生物专业从事高端水纯化和实验室分离纯化产品的研发、设计和制造，致力于，为生命科学和生物技术提供精锐品质、高附加值的创新产品。乐枫产品线包括实验室纯水系统、密理博纯水兼容耗材和实验室分离纯化过滤产品。成立十年，乐枫创立出了自己的品牌RephiLe（瑞枫），拥有30多项专利和多个软件著作权。产品销往全球近100个国家和地区。更多 RephiLe 产品信息，请登陆：乐枫官网www.rephile.com
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